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摘要
本研究旨在用原核生物表达系统来表达非洲猪瘟病毒（ASFV）的B646L基因。获得其编码的p72重组蛋白，并针对纯化的p72重组蛋白制备多克隆抗体。将ASFV B646L全长基因连入pcold-Ⅰ表达载体，构建原核重组表达质粒，经1 mmol/L IPTG于16℃诱导16 h后，利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析。然后用纯化的p72重组蛋白为免疫原制备鼠源抗p72多克隆抗体，经过4次免疫后获得p72蛋白的多克隆抗体，随后采取血清来检测多克隆抗体。结果显示，利用p72蛋白制备的多克隆抗体具有较高的抗体效价和特异性，为进一步对ASFV B646L基因建立快速、特异的血清学诊断技术奠定基础。
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单位江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 扬州大学; 中国农业科学院上海兽医研究所
