摘要

目的探讨维生素C(vitamin C,VC)对甘氨酸受体(glycine receptor,GlyR)功能的影响。方法使用表达GlyR不同亚型的质粒转染HEK-293T细胞,并孵育不同浓度的VC,通过膜片钳技术记录孵育VC前后GlyR在EC2浓度的甘氨酸(glycine,Gly)作用下所介导的氯电流。检测2型钠离子依赖性维生素C转运体(sodium-dependent vitamin C transporter-type 2,SVCT2)的抑制剂磺吡酮(sulfinpyrazone,SE)对VC与GlyR关系的影响。通过氨基酸点突变探究VC作用于GlyR的可能位点。结果 VC剂量依赖的增强GlyRα1和GlyRα3介导的电流,并且GlyRα3对VC的作用更加敏感。对于GlyRα2,VC并未表现出显著的增强作用。SE不影响VC对GlyR介导的电流的增强作用。GlyR第3跨膜片段的第296位丝氨酸的突变显著降低了VC对GlyR功能的增强效果。结论 VC显著增强GlyRα1和GlyRα3的功能,但不影响GlyRα2的功能。VC对GlyR的作用不是通过进入细胞内起作用的。GlyR第296位的丝氨酸在VC对GlyR功能的增强作用中起关键作用。

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