猪TGF-β_1基因重组慢病毒载体的构建及其在BMSCs中的表达

作者：赖建明; 林建华; 林文平; 吴朝阳

来源：中国修复重建外科杂志, 2012, (07): 849-854.

• 组织工程
• BMSCs
• TGF-β1
• Ⅱ型胶原
• 关节软骨
• 基因治疗
• 慢病毒载体
• 猪 Tissue engineering Bone marrow mesenchymal stem cells Transforming growth factor β 1 Collagen type II Articular cartilage Gene therapy Lentiviral vector Pig

目的构建猪TGF-β1重组慢病毒表达载体,并转染BMSCs,为构建组织工程骨软骨提供TGF-β1修饰的BMSCs,作为持续、高效的种子细胞。方法将已获取的目的基因TGF-β1cDNA包装至慢病毒载体中,通过PCR及基因测序对阳性克隆进行鉴定,并测定病毒滴度。取2月龄巴马香猪(体重约15 kg)骨髓制备BMSCs,取第2～3代用于实验。用TGF-β1重组慢病毒载体以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为10、50、70、100、150分别转染BMSCs,通过激光共聚焦显微镜观察,并以Western blot检测不同MOI值的转染效果,确定最佳MOI值。用TGF-...

• 单位
  福建医科大学; 福建医科大学附属第二医院; 福建医科大学附属第一医院