摘要
目的构建丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)NS3非结构蛋白表达模型,探讨HCV NS3蛋白对细胞的的增殖作用以及细胞端粒酶活性的影响。方法运用分子克隆技术构建重组质粒pcDNA3.1(+)/HCV NS3,脂质体转染人胚胎肝细胞L02细胞株建立稳转细胞株,MTT法检测细胞的增殖,Telo TAGGG Telomerase PCR ELISA试剂盒检测细胞端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)mRNA的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/HCV NS3重组质粒,稳转细胞株可检测到HCV NS3蛋白的表达,稳转细胞株增殖能力增加,hTERT mRNA表达增加,端粒酶活性被激活。结论 HCV NS3蛋白可以促进细胞的增殖,诱导hTERT mRNA基因表达上调从而激活端粒酶活性。
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单位平顶山市第一人民医院