NKX2-5基因63A>G突变对先天性心脏病相关基因表达的影响

作者：谢华斌; 葛高顺; 王莹莹; 方宜臻; 马芳芳; 倪二茹^*

来源：广西医学, 2021, 43(15): 1852-1857.

• 先天性心脏病
• NK2同源异型框5基因
• 基因突变
• 细胞增殖
• 细胞周期
• 下游信号通路
• 骨形成发生蛋白
• 心肌细胞增强因子2C

目的探讨NK2同源异型框5(NKX2-5)基因63A>G突变对先天性心脏病相关基因表达的影响。方法构建绿色荧光蛋白(GFP)空载质粒、NKX2-5质粒和NKX2-5 63A>G质粒,将其分别转染至P19细胞,并分别设为GFP组、NKX2-5组和NKX2-5 63A>G组。通过荧光镜观察和检测GFP蛋白表达情况以评价转染效果。检测3组P19细胞转染后的细胞周期、细胞增殖情况,NKX2-5、GATA结合蛋白4(GATA4)、T盒转录因子5(TBX5)以及三者下游信号通路基因的mRNA表达水平。结果成功构建稳定转染细胞株。转染后,NKX2-5组的细胞增殖能力和S期细胞比例低于GFP组,而G1期细胞比例高于GFP组;NKX2-5 63A>G组的细胞增殖能力和S期细胞比例高于NKX2-5组,而G1期细胞比例低于NKX2-5组(均P<0.05)。3组P19细胞中NKX2-5、GATA4、TBX5的mRNA表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05);但NKX2-5组骨形成发生蛋白4(BMP4)和心肌细胞增强因子2C(MEF2C)的mRNA表达水平高于GFP组,而NKX2-5 63A>G组BMP4和MEF2C的mRNA表达水平低于NKX2-5组(均P<0.05)。结论 NKX2-5基因可抑制心肌细胞的增殖,而NKX2-5基因63A>G突变或可通过影响BMP4和MEF2C等基因的表达从而调控心肌细胞的细胞周期及增殖。

• 单位
  厦门大学