高效液相色谱-串联质谱法定量测定大鼠血浆中LMV-12(HE003)及其代谢产物M4

作者：刘淑洁; 闻镍; 王宇; 黄舒佳; 淡墨; 汤瑶; 王晓霞; 陶琳; 耿兴超; 王三龙^*; 刘丽^*

来源：中国医药生物技术, 2021, 16(05): 426-432.

• 高效液相色谱-串联质谱法
• LMV-12
• M4
• SD大鼠
• 生物分析
• 蛋白沉淀
• 方法学验证

目的建立一种高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定SD大鼠血浆中LMV-12(HE003)(以下简称LMV-12)及其活性代谢产物M4的方法,并开展完整的生物分析方法学验证。方法采用蛋白沉淀提取血浆中LMV-12及M4,用HPLC-MS/MS方法进行定量分析。采用ACQUITY HPLC?CSH C18色谱柱,以0.3%甲酸/40 mmol/L甲酸铵水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱实现快速分离。质谱采用电喷雾离子化电离源(ESI)、正离子检测模式和选择反应监测(SRM),用于定量分析的离子反应为m/z674.300→169.200(LMV-12),m/z661.200→156.000(M4)和m/z688.200→183.000(内标CH3-LMV-12)。结果完整的生物分析方法学验证结果显示,在本方法中LMV-12血浆浓度在20～8000 ng/ml范围内、M4浓度在5～2000 ng/ml范围内线性关系良好,方法的选择性、残留、准确度、精密度、基质效应、稳定性均满足生物样品定量分析要求。结论本方法检测快速、灵敏度高、操作简便、重现性好,能同时检测出LMV-12原型药及其代谢产物M4,适用于LMV-12的大鼠药代动力学和毒代动力学研究。

• 单位
  南昌弘益药业有限公司; 中国食品药品检定研究院