内蒙古地区牛支原体的分离鉴定及遗传进化分析

作者：刘重阳; 范文霞; 张智; 乌吉斯古楞; 韩宇; 张彦婷; 陈学飞; 纪燕; 刘玉梅; 宋庆庆; 关平原; 黄海碧^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (17): 71-146.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.01.0093

• 牛支原体
• 分离鉴定
• 遗传变异
• 16S rDNA基因
• 毒力基因
• 遗传进化

为了调查内蒙古地区牛支原体的遗传变异情况,试验对从呼和浩特市10个牧场收集的40份疑似支原体病例的鼻拭子、肺脏、乳样等病料组织进行分离培养、分子生物学鉴定、致病性试验、药敏试验、系统进化树构建和同源性分析。结果表明:病料经纯化培养后在PPLO固体培养基上出现针尖大小透明菌落,有中心脐,边缘整齐,吉姆萨染色后可见明显的蓝紫色菌体,共分离得到了10株牛支原体。通过双重PCR扩增得到大小为238 bp、140 bp的10条特异性条带。5株强毒株140036-1、Z5-4、Z5-3、Z5-2、dong5-3对大多数牛有致病性,5株弱毒株0051-1、he6-3、0047-1、0047-2、0047-3对牛几乎无影响。10株牛支原体对恩诺沙星、氟苯尼考、大观霉素、四环素、多西环素敏感,对链霉素、氨苄西林、甲硝唑、头孢曲松耐药。10株牛支原体与国内外参考株形成2个大支,其中强毒株140036-1株与亲本株PG45遗传距离最近,同源性为99.6%;140036-1、Z5-3、Z5-2、Z5-4株与国内经典流行代表株Hubei-1及HB0801株亲缘关系较近,同源性为99.4%～99.7%,这4株强毒株间的同源性为99.4%～99.6%,同源性较高;强毒株dong5-3与亲本株PG45遗传距离最远,同源性为98.9%。5株弱毒株0051-1、he6-3、0047-2、0047-1、0047-3与亲本株PG45遗传距离相对较远,同源性为91.7%～99.2%。说明内蒙古地区牛支原体总体遗传变异速度较慢,周期性较长,较稳定,其中强毒株与国内经典流行代表株及亲本株更为接近。

• 单位
  兽用疫苗国家工程实验室; 金宇保灵生物药品有限公司; 内蒙古农业大学