hsa-miR-223表达载体构建及其对靶基因ARTN的调控

作者：吴文新; 陈彦亮; 刘增良; 和宇峥; 崔爱荣; 李书军

来源：中国肿瘤临床, 2011, (09): 503-507.

• hsa-miR-223
• 真核表达载体
• 报告基因 Hsa-miR-223
• Eukaryotic expression vector
• Reporter gene

目的:构建hsa-miR-223真核表达载体,并在人食管癌细胞KYSE-150中验证hsa-miR-223对靶基因artemin(ARTN)的调控作用。方法:以基因组DNA为模板,RT-PCR扩增包括hsa-miR-223前体序列在内的基因序列,并将其克隆到载体pCD-NA3.1(+)上,通过实时定量PCR方法检测hsa-miR-223在人胚肾HEK293细胞中的表达。根据生物信息学预测软件TargetScan、mirBase和picTar对hsa-miR-223靶基因进行预测,将靶基因ARTN的3UTR区融合到pMIR荧光素酶基因下游,通过双荧光素酶报告基因检测hsa-miR-223对靶基因...

• 单位
  河北医科大学第二医院