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摘要
前列腺素受体EP4（prostaglandinE4receptor，EP4）是前列腺素E2（prostaglandinE2，PGE2）的受体亚型之一，是一种G蛋白偶联受体（G-proteincoupledreceptor，GPCR），可通过调控环磷酸腺苷（Cyclicadenosinemonophosphate，cAMP）的浓度参与调控细胞的生理活动。为探讨EP4在马氏珠母贝（Pinctadafucatamartensii）的功能分化和表达调控机制，本实验采用RACE技术获取马氏珠母贝两个EP4基因（PmEP4-1和PmEP4-2）的cDNA全长序列，应用实时荧光定量PCR（qPCR）技术检测它们在各组织中的表达差异，分析两个EP4亚型在马氏珠母贝不同组织中的功能分化特征，并利用生物信息学方法分析其表达调控机制，探讨其功能分化机制。结果显示PmEP4-1基因cDNA序列全长1575bp，开放阅读框（ORF）1098bp，编码365个氨基酸；PmEP4-2基因的cDNA 全长1976 bp，其中ORF长1533 bp，编码510个氨基酸；序列分析表明PmEP4-1和PmEP4-2在胞内和胞外部分的氨基酸序列差异较大，并且蛋白质功能位点个数不同，说明其功能可能存在差异；进化树分析表明PmEP4-1和PmEP4-2起源于不同的祖先基因。荧光定量PCR检测结果显示两者在各组织中均表达，但存在不同的表达模式，PmEP4-1在血液中表达量最高，PmEP4-2在肝胰腺中表达量最高，进一步说明两个基因亚型的功能差异。生物信息学分析说明PmEP4-1的表达受Mat1-Mc、XFD-2、Oct-1等转录因子调控，而PmEP4-2的表达受Oct-1、CF2-II、Barbie Box等转录因子调控。本研究为进一步探究EP4在马氏珠母贝中的生物学功能提供数据基础。
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