红色荧光示踪狂犬病病毒ERA株病毒粒子方法的建立

作者：单博文; 王金良; 刘仁强; 帅磊; 王喜军; 葛金英; 温志远; 夏咸柱; 步志高

来源：中国预防兽医学报, 2018, 40(02): 112-116.

• 狂犬病病毒
• ERA株
• 标记
• 活细胞成像

为建立一种狂犬病病毒(RABV)荧光标记方法,便于有效地观察研究RABV侵入细胞及脱壳的过程,本研究采用CY5-NHS酯红色荧光染料标记氨基的方法将纯化的RABV ERA株进行CY5-NHS酯荧光染料标记;采用亲脂性羰花青荧光染料将细胞膜染成绿色;采用DNA荧光染料将细胞核染成亮蓝色;在3D活细胞激光共聚焦分析成像系统下成像,动态观察病毒吸附细胞并内吞的过程。与传统的染色方法相比,本研究建立的病毒标记方法更适合在3D活细胞激光共聚焦分析成像系统下观察和拍摄RABV感染细胞的过程,为RABV感染机制的研究提供了一种有效研究方法,对于其它弹状病毒科病毒标记方法的建立也具有一定的参考意义。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室