氨基糖苷类药物耐药基因armA实时荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

作者：龚林; 袁敏; 陈霞; 禹蕙兰; 卢金星; 李娟

来源：疾病监测, 2014, 29(11): 901-904.

• armA基因
• 实时荧光定量-聚合酶链反应
• 粪便模拟标本

目的建立一种快速、准确检测细菌中arm A耐药基因的Taq Man实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative-polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。方法根据arm A基因设计特异的引物及探针,在多种常见致病菌中检测其特异性;使用阳性质粒标准品评价该方法的灵敏度;使用粪便模拟标本验证该方法的应用性。结果本方法特异性好,建立的arm A耐药基因real-time PCR方法标准曲线,确定其对质粒标准品的灵敏度为4.07×101拷贝/ml。应用该方法对粪便模拟标本进行检测,其检测下限为1.3×104cfu/ml。结论本研究建立了arm A耐药基因荧光定量PCR检测方法,有望在耐药基因监测中推广使用。

• 单位
  中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室