miR-128-3p靶向沉默HO-1促进角质形成细胞炎症介质分泌

作者:隆岚; 龙海东; 杨逸韵; 于小华*
来源:中国皮肤性病学杂志, 2022, 36(10): 1126-1131.
DOI:10.13735/j.cjdv.1001-7089.202106112

摘要

目的 探讨miR-128-3p对角质形成细胞HaCaT促炎介质分泌的影响及机制。方法 收集银屑病患者的皮损组织和正常皮肤组织,荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-128-3p和血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA表达,并对两者的相关性进行分析。生物信息学预测和荧光素酶报告基因分析miR-128-3p与HO-1之间的靶向作用关系。培养HaCaT细胞,在脂多糖处理后,转染miR-128-3p mimic/inhibitor, qRT-PCR检测白介素(IL)-1β和IL-6 mRNA表达,qRT-PCR和Western blot检测HO-1表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中IL-1β和IL-6水平。以HO-1抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)处理HaCaT细胞后再用miR-128-3p inhibitor转染,qRT-PCR检测IL-1β和IL-6 mRNA表达,ELISA检测上清液中IL-1β和IL-6水平。结果 银屑病患者皮损组织中miR-128-3p表达上调,HO-1表达下调,两者呈负相关。HO-1为miR-128-3p的靶基因,miR-128-3p在转录后水平降低HO-1表达,促进IL-1β和IL-6表达与分泌,并且HO-1抑制剂ZnPPⅨ预处理消除了miR-128-3p inhibitor对IL-1β和IL-6表达与分泌的影响。结论 miR-128-3p促进HaCaT细胞分泌IL-1β和IL-6,其机制与靶向沉默HO-1有关。

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