氨基脱氧分支酸合成酶对谷氨酸棒杆菌生长和产L-丝氨酸的影响

作者：刘安倩; 颜文斌; 肖文翰; 张晓梅^*; 史劲松; 许正宏

来源：食品与发酵工业, 2023, 49(19): 15-21.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.034927

• L-丝氨酸
• 谷氨酸棒杆菌
• pabAB
• 氨基脱氧分支酸合成酶
• 定点突变
• 基因敲除

L-丝氨酸是化学和材料领域中最为重要的30个骨架化合物之一，但至今尚未实现微生物发酵法工业化生产L-丝氨酸。氨基脱氧分支酸合成酶(aminodeoxychorismate synthase, ADC synthase)是L-丝氨酸分解代谢相关的关键酶，研究前期发现，与出发菌株SSAAI相比，通过ARTP诱变获得的高产L-丝氨酸突变株A36中氨基脱氧分支酸合成酶编码基因pabAB 426位发生点突变(T426I),而氨基脱氧分支酸合成酶基因突变对酶活力、菌株生长及产L-丝氨酸的影响尚未见报道。该文采用pK18 mobsacB质粒在出发菌株SSAAI上对pabAB进行426位定点突变(T426I)研究，结果发现，pabAB定点突变株的生物量比出发菌株SSAAI下降29.3%,L-丝氨酸产量提高15.9%。同时对氨基脱氧分支酸合成酶酶活力进行测定，发现氨基脱氧分支酸合成酶编码基因pabAB 426位的T426I突变导致酶的比活力下降。进一步采用不同强度的启动子调控高产菌株A36中氨基脱氧分支酸合成酶的活力，构建重组菌株A36-Pkan和A36-Dap-e;与出发菌株A36相比，重组菌氨基脱氧分支酸合成酶的比酶活力均有提高，发酵120 h时，生物量分别提高8.3%和16%,而L-丝氨酸产量分别下降18.2%和22.6%,说明提高氨基脱氧分支酸合成酶酶活力有利于谷氨酸棒杆菌生长却不利于产L-丝氨酸。

• 单位
  生物工程学院; 江南大学