PKD2在骨髓间充质干细胞成脂分化过程中的表达变化及作用

作者：单丽英; 吴晓文; 师晓丽; 朱恩东; 袁海瑞; 王宝利^*

来源：山东医药, 2021, 61(14): 1-5.

• 多囊肾致病基因2
• 骨髓间充质干细胞
• 成脂分化
• Wnt/β-catenin信号通路

目的观察多囊肾致病基因2(PKD2)在骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化过程中的表达变化及作用。方法培养骨髓间充质干细胞株ST2并进行成脂分化诱导,采用qRT-PCR法分别检测成脂分化诱导0、1、2、3、4、5 d时细胞中的PKD2基因。以pcDNA3.1为载体,构建PKD2过表达质粒。将ST2细胞分为对照组(转染pcDNA3.1质粒)和实验组(转染PKD2过表达质粒),进行成脂分化诱导,采用油红O染色进行鉴定;采用qRT-PCR法检测成脂分化相关基因[过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、脂肪酶(adipsin)mRNA];采用Western blotting法检测PPARγ、C/EBPα、FABP4。将ST2细胞分为对照组和实验组,分别转染pcDNA3.1与PKD2过表达质粒,不进行成脂分化诱导,转染后72 h采用Western blotting法检测Wnt信号通路相关蛋白(t-Lrp6、p-Lrp6、t-GSK3β、p-GSK3β、t-β-catenin、活化β-catenin、TCF7L2)。结果成脂分化诱导1 d以后ST2细胞中PKD2基因相对表达量均显著高于0 d时,以诱导4 d时PKD2基因相对表达量最高(P均<0.05)。实验组油红定量少于对照组(P<0.05)。实验组细胞中PPARγ、C/EBPα、FABP4、adipsin mRNA表达低于对照组;PPARγ、C/EBPα、FABP4蛋白表达低于对照组(P均<0.05)。实验组细胞中p-Lrp6、p-GSK3β、活化β-catenin、TCF7L2表达高于对照组(P均<0.05)。结论 ST2细胞成脂分化过程中PKD2的表达增高;PKD2过表达可抑制BMSCs向脂肪细胞分化,机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

• 单位
  基础医学院; 天津医科大学