野葛特异性PCR检测方法的建立与应用研究

作者：张丽; 刘良科; 郑丽平; 刘秤利; 刘虹; 覃瑞^*

来源：中南民族大学学报(自然科学版), 2019, 38(02): 204-209.

• 野葛
• 特异性PCR
• 查尔酮合成酶基因
• 成分鉴定

一个物种特有的DNA序列可以开发成能够识别该物种及其加工产品的标记.为寻找野葛(Pueraria lobata)特有的DNA序列,建立野葛特异性PCR检测方法,通过对Gen Bank中野葛基因信息的检索分析,筛选出了同源序列少特异性强的野葛查耳酮合成酶基因作为研究对象.对该基因的特定区域设计引物,建立了野葛特异性定性PCR检测方法.利用该方法对野葛14个不同居群的DNA进行PCR扩增,均能扩增出226 bp的片段.而用相同引物分别对20种其他植物的DNA进行扩增均未出现特异性扩增产物. PCR灵敏度实验结果表明该方法的检测灵敏度达到0.02 ng基因组DNA,对市场上的葛根产品进行检测结果表明该方法可以有效鉴定葛根产品中是否含有野葛成分.该野葛特异性PCR检测方法特异性强、灵敏度高,可用于野葛成分的检测与鉴定.

• 单位
  生命科学学院; 怀化学院; 中南民族大学