运用变性高效液相色谱快速检测TEM型产超广谱β-内酰胺酶菌株

作者：刘彩林; 孙自镛; 汪峰; 汪玥; 欧国平; 廖亚龙; 徐令清; 孙明月; 朱旭慧

来源：国际检验医学杂志, 2012, 33(11): 1283-1285.

• 变性高效液相色谱
• 超广谱β-内酰胺酶
• TEM型
• 基因分型

目的建立一种快速检测TEM型产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)临床分离菌及其流行病学监测的新方法。方法采用PCR技术从临床分离株中扩增出TEM型质粒的编码序列,扩增产物用变性高效液相色谱(DHPLC)技术进行分析并进行DNA测序,确定其基因突变的类型,最后通过比对确定其基因型。结果共检测66株临床分离菌,其中42株扩增出TEM型基因。经过DHPLC分析,35株表现为单一的洗脱峰,其形态与TEM-1标准菌株的峰型相一致,测序确定它们的碱基序列亦相一致,不存在变异,为TEM-1型;5株表现为一种异常的洗脱峰,它们均为双峰,形态一致,测序结果表明它们均存在两种相同的基因突变,经比对后确定为TEM-10型;另外2株表现为另一种异常的洗脱峰,测序结果显示为TEM-116型。结论 DHPLC技术可用于细菌耐药基因的分型检测,不但灵敏度和特异度高,而且具有经济、快捷、高通量等特点,具有很大的潜在临床应用价值。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院