猪圆环病毒2型Cap全基因的克隆与原核表达

作者：李海花; 覃尧; 张全红; 李秀丽

来源：中国畜牧兽医, 2015, 42(02): 337-341.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2015.02.015

• 猪圆环病毒2型
• Cap基因
• 克隆
• 原核表达

Cap蛋白是猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)的主要结构蛋白,能诱导免疫保护,是临床上利用血清学诊断PCV2的主要依据。本研究根据PCV2TJ株全基因核苷酸序列(GenBank登录号:KC751546)设计特异性引物,利用PCR从PCV2TJ株扩增获得Cap全基因,将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒pET32a-Cap,经IPTG诱导获得约48ku的重组融合蛋白,Western blotting分析结果表明其与小鼠抗6×His单克隆抗体和PCV2阳性猪血清均呈阳性反应。本研究成功克隆Cap全基因,构建原核表达载体,并实现Cap融合蛋白的表达,这为PCV2Cap蛋白的功能研究及诊断方法的建立和亚单位疫苗的研制奠定了基础。

• 单位
  国家知识产权局; 天津市畜牧兽医研究所; 中国农业大学