旋毛虫Ts-DNaseⅡ-7蛋白对Caco-2肠上皮细胞屏障的影响

作者：李风; 王静; 刘晓雷; 白雪; 唐斌; 丁静; 白玉梅^*; 刘明远^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(03): 351-357.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0052

• 旋毛虫
• Ts-DNaseⅡ-7
• 肠屏障
• 通透性
• 紧密连接蛋白

为了探索旋毛虫成虫期核酸酶家族Ts-DNaseⅡ-7蛋白对Caco-2肠上皮细胞屏障模型的作用及机制，本研究采用Transwell细胞培养板构建Caco-2肠上皮细胞屏障，当跨膜电阻值(TEER)达到400Ω·cm2即判定肠上皮屏障模型构建成功。将试验组分为对照组(control)、PBS组、Ts-DNaseⅡ-7组(5μg/m L)、阳性对照LPS组(15μg/m L)，作用48 h后，检测跨上皮电阻值(TEER)和对FITC的通透性；Western-blot和荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞Claudin 1、Occludin和ZO-1的蛋白表达水平和m RNA表达水平；通过细胞免疫荧光观察各组紧密连接蛋白的分布情况。结果，与对照组相比，Ts-DNaseⅡ-7组在第48小时TEER值降低，FITC的通透性增加；Claudin 1、Occludin和ZO-1的蛋白及m RNA的表达水平降低；免疫荧光试验可见细胞间的网状结构荧光不连续。结果表明，旋毛虫成虫期Ts-DNaseⅡ-7蛋白可破坏肠上皮细胞的物理屏障，有助于旋毛虫实现顺利寄生。

• 单位
  吉林大学