鲤疱疹病毒2型与3型双重PCR检测方法的建立与应用

作者：陈永聪; 方勤美; 柯翎^*

来源：福建农业学报, 2023, 38(06): 652-656.

DOI：10.19303/j.issn.1008-0384.2023.06.003

• 鲤
• 疱疹病毒
• 双重PCR

【目的】鲤疱疹病毒2型和3型对鲤科鱼类危害严重，本研究旨在建立快捷、高效且能同时检测2种鲤疱疹病毒的检测技术。【方法】根据鲤疱疹病毒2型和3型的DNA聚合酶基因保守序列，设计2对特异性引物，通过对双重PCR反应条件的优化，建立检测鲤疱疹病毒2型和3型的双重PCR方法；使用该方法对试验室保存的鲫和鲤病鱼组织样品进行检测。【结果】该方法能够分别对鲤疱疹病毒2型和鲤疱疹病毒3型各扩增出715 bp和456bp的特异性条带，表现出良好的特异性；敏感性试验结果显示，该方法的检测极限值为100 copies·μL-1，具有较高的灵敏性。使用该方法对本试验室保存的18份临床病料进行PCR检测并对PCR产物进行测序验证，结果显示CyHV-2和CyHV-3阳性的各有3份，其阳性率都为33.3%；分别对2份CyHV-2和CyHV-3阳性样品混合后进行检测，结果混合样品均为CyHV-2和CyHV-3双阳性，与常规检测方法得到的结果相同。【结论】本研究建立的双重PCR检测方法特异性强、灵敏度高，可用于CyHV-2和CyHV-3的快速检测和鉴别诊断。

• 单位
  福建省农业科学院