鼠疫菌聚合酶螺旋反应等温扩增方法的建立

作者：张乔; 刘威; 高玉峰; 田丽; 施琦; 杨燕; 张晓龙; 王静^*

来源：中国国境卫生检疫杂志, 2020, 43(02): 77-81.

DOI：10.16408/j.1004-9770.2020.02.001

• 聚合酶螺旋反应
• 鼠疫菌
• 等温扩增

目的用聚合酶螺旋反应(PSR)建立快速、灵敏、特异的鼠疫菌等温扩增方法。方法根据鼠疫菌F1基因设计引物,利用Bst DNA聚合酶链置换活性,通过添加pH指示剂和核酸荧光染料SYBR GreenⅠ,建立可视化PSR检测方法,并用于鼠脏器、血液、环境样本中鼠疫菌的检测。结果建立的PSR方法可在40 min内得到结果,最佳反应温度为64℃,最低检测限为100拷贝/μl,与14株非鼠疫菌无交叉反应。可成功检测模拟阳性样本。结论建立的PSR等温扩增反应为鼠疫菌的快速检测提供了新方法。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院