PRDM1调控NF-κB信号通路对巨噬细胞极化和功能的影响

作者：张梦莹; 李志; 李雪琴; 钟民; 吕坤^*

来源：中国免疫学杂志, 2021, 37(11): 1286-1291.

• 巨噬细胞极化
• PRDM1基因
• 核转录因子κB

目的:本文旨在探讨正性调节区锌指蛋白1(PRDM1)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)极化和功能的影响及其分子机制。方法:体外提取BMDMs作为研究对象,并进行极化诱导,采用荧光定量PCR和Western blot法检测不同极化状态的巨噬细胞PRDM1的表达水平;设计构建PRDM1过表达腺病毒载体,瞬时感染BMDMs,48 h后分别加入IFN-γ/LPS或IL-4刺激诱导为M1/M2型巨噬细胞,采用荧光定量PCR分别检测M1/M2的标志基因iNOS、IL-12、TNF-α、Arg1、YM-1、FIZZ1的表达;ELISA法检测各组细胞上清液炎症因子TNF-α、IL-12和IL-13的表达量;细菌杀伤试验和吞噬试验检测PRDM1过表达对巨噬细胞功能的影响;构建巨噬细胞M2极化模型,将PRDM1过表达腺病毒感染细胞,Western blot法检测核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中的下游信号分子p65及IKK蛋白的总体水平及磷酸化水平。结果:荧光定量PCR和Western blot结果显示,M1型巨噬细胞的PRDM1表达水平显著高于M2型巨噬细胞;与阴性对照组相比,过表达PRDM1明显促进巨噬细胞M1型标志分子iNOS、IL-12及TNF-α的表达,能抑制M2型标志分子Arg1、YM-1及FIZZ1的表达;并且显著增强BMDMs的杀菌活性,而降低了BMDMs的吞噬功能。在M2型巨噬细胞中过表达PRDM1后,NF-κB信号通路中p65及IKK磷酸化水平较阴性对照组显著升高。结论:NF-κB信号通路可能参与PRDM1调控巨噬细胞的M1极化。

• 单位
  中心实验室; 皖南医学院第一附属医院