柑橘抗溃疡病转录因子CsAP2-09互作蛋白筛选与分析

作者：祁静静; 窦万福; 张庆雯; 胡安华; 陈善春; 雷天刚; 彭爱红; 许兰珍; 姚利晓; 何永睿^*; 李强^*

来源：园艺学报, 2020, 47(03): 432-444.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2019-403

• 柑橘
• 柑橘溃疡病
• GST pull-down
• CsAP2-09
• AP2/ERF
• 互作蛋白

以前期获得的柑橘抗溃疡病的正调控转录因子基因CsAP2-09超表达植株为材料,利用GST融合蛋白沉降技术(GST pull-down)联合液相色谱串联质谱(LC–MS/MS)方法筛选并鉴定CsAP2-09的互作蛋白。首先原核表达并纯化GST-CsAP2-09作为诱饵蛋白,然后与CsAP2-09超表达植株叶片总蛋白孵育、洗脱后进行SDS-PAGE验证,最后进行LC–MS/MS鉴定。得到17个互作蛋白,将蛋白进行注释、GO分析、KEGG分析,发现其中5个可能与植物抗病相关(如过氧化氢酶Cs3g27280)。构建这17个蛋白的互作网络,其中14个蛋白的互作关系得到已有数据的支持。对CsAP2-09与互作蛋白的共表达分析发现CsAP2-09超表达引起了16个蛋白表达上调和1个蛋白表达下调。

• 单位
  国家柑桔工程技术研究中心; 西南大学; 中国农业科学院柑桔研究所