黄连温胆汤对IGT大鼠骨骼肌细胞焦亡经典通路的影响

作者：田旭升; 李云凤; 李寒; 王宁; 陆阁玲; 陈冰冰; 辛相如; 马伯艳^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2021, 27(18): 1-8.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211704

• 黄连温胆汤
• 骨骼肌细胞焦亡
• 糖耐量低减(IGT)
• 炎症反应

目的:基于NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)/白细胞介素-1β(IL-1β)/白细胞介素-18(IL-18)经典通路,探讨黄连温胆汤对糖耐量低减(IGT)大鼠骨骼肌细胞焦亡的影响,并阐释其可能作用机制。方法:健康雄性SD大鼠予45%脂肪热能的高脂饲料长期喂养20周诱导IGT大鼠模型。造模成功后将实验分为4组,分别为正常组、模型组、阳性药组(盐酸二甲双胍,0.05 g·kg-1·d-1)和黄连温胆汤组(7.8 g·kg-1d-1),正常组和模型组则给予相应体积蒸馏水,各组给药体积均为10 mL·kg-1d-1,连续灌胃给药4周。实验结束后取血分离血清并取大鼠骨骼肌进行液氮保存。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清IL-1β和IL-18含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测骨骼肌组织NLRP3,Caspase-1,GSDMD mRNA及蛋白表达水平;免疫荧光法观测骨骼肌组织GSDMD,IL-1β和IL-18蛋白表达;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠骨骼肌组织病理学变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中IL-1β,IL-18含量和骨骼肌组织中NLRP3,Caspase-1,GSDMD mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);免疫荧光检测显示IGT大鼠骨骼肌组织GSDMD,IL-18和IL-1β蛋白含量显著上升(P<0.01);HE染色可见骨骼肌组织具有明显病理形态变化。与模型组比较,黄连温胆汤和盐酸二甲双胍组均可有效降低IGT大鼠血清IL-18和IL-1β含量和骨骼肌组织NLRP3,Caspase-1,GSDMD mRNA和蛋白表达(P<0.01);免疫荧光技术结果表明黄连温胆汤能有效降低IGT大鼠骨骼肌组织GSDMD,IL-1β和IL-18蛋白含量(P<0.01);HE染色结果表明黄连温胆汤能改善大鼠骨骼肌组织形态变化。结论:黄连温胆汤对IGT大鼠骨骼肌细胞焦亡具有抑制作用,其作用机制与调节细胞焦亡经典途径中NLRP3/Caspase-1/GSDMD/IL-1β/IL-18通路具有重要关系。

• 单位
  黑龙江中医药大学