电针对膝骨关节炎大鼠膝关节滑膜组织细胞焦亡的影响

作者：喻溢楠; 唐成林^*; 郭啸; 谢友红

来源：针刺研究, 2022, 47(06): 471-478.

DOI：10.13702/j.1000-0607.20211269

• 膝骨关节炎
• 电针
• 滑膜炎
• 细胞焦亡

目的:观察电针对膝骨关节炎(KOA)大鼠膝关节滑膜组织中细胞焦亡相关蛋白的影响，探究电针治疗KOA的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和药物组，每组10只。用4%木瓜蛋白酶0.2 mL关节腔注射建立KOA大鼠模型。电针组予右膝关节“内膝眼”“犊鼻”电针治疗，15 min/次，1次/d, 6 d/周，连续4周。药物组予塞来昔布24 mg/kg灌胃，1次/d, 6 d/周，连续4周。干预前后采用Lequesne评分评估大鼠KOA功能障碍程度；ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-1β和IL-18的含量；HE染色法观察右膝关节滑膜组织的形态学变化并进行滑膜炎病理评分；免疫组织化学法观察右膝关节滑膜组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)的表达；实时荧光定量PCR法检测右膝关节滑膜组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Gasdermin D(GSDMD)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、IL-1β、 IL-18 mRNA的表达；Western blot法检测右膝关节滑膜组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β、IL-18蛋白的表达。结果:与对照组比较，模型组右膝关节Lequesne评分和滑膜炎病理评分显著上升(P<0.01),血清中IL-1β、IL-18的含量显著增加(P<0.01),NLRP3在滑膜内衬层和血管、炎性细胞中大量表达，滑膜中NLRP3、ASC、GSDMD、Caspase-1、IL-1β、 IL-18的mRNA和蛋白表达水平及GSDMD-N的蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较，电针组和药物组右膝关节Lequesne MG评分和滑膜炎病理评分显著降低(P<0.01),血清中IL-1β、IL-18的含量显著降低(P<0.01),NLRP3在滑膜内衬层和血管、炎性细胞中有少量阳性表达，滑膜中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18的mRNA和蛋白表达水平及GSDMD-N的蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),GSDMD的mRNA表达水平降低(P<0.05),药物组GSDMD蛋白表达水平降低(P<0.05)。与药物组比较，电针组血清中IL-1β、IL-18的含量升高(P<0.05),滑膜组织中IL-1β的mRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.01,P<0.05)。结论:电针能减轻KOA大鼠膝关节滑膜组织的炎性反应，其机制可能与下调NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β和IL-18的表达水平，减少滑膜组织中细胞焦亡的发生有关。

• 单位
  重庆医科大学; 医药学院