小麦背景中黑麦遗传物质的快速检测方法

作者：张蔚; 熊自颖; 段延玲; 罗涛; 罗杰; 唐宗祥; 符书兰^*

来源：麦类作物学报, 2023, 43(02): 157-163.

• 小麦
• 黑麦
• 易位染色体
• 寡核苷酸探针

黑麦(Secale cereale L.)基因资源在小麦(Triticum aestivum L.)品种改良方面具有很大的利用潜力。建立一种高效鉴定小麦背景中黑麦染色体的细胞学标记方法，有利于黑麦优良基因/遗传物质的追溯和高效利用。本研究利用核仁组织区(NOR)核糖体DNA(rDNA)串联重复序列，开发了一种新的寡核苷酸探针Oligo-1RNOR。非变性荧光原位杂交(ND-FISH)试验表明，该探针可专化性识别黑麦1R染色体的NOR区域，并产生强于Oligo-5BL.46的信号。同时，为了提高外源遗传物质细胞学鉴定的效率，建立了一种快速、简便制备小麦间期细胞的方法。利用基于Oligo-1RNOR、Oligo-pSc200和Oligo-pSc250探针的ND-FISH对制备的间期细胞滴片进行分析，结果与中期染色体细胞滴片的FISH结果相同，均能够清楚地判定材料中是否含有黑麦染色体。该方法无需制备中期染色体，叶片和根尖均可用于制备间期细胞，避免了常规细胞学根尖组织制片的预处理和固定程序，为检测小麦背景中的黑麦遗传物质或小麦-黑麦易位染色体提供了更方便的技术手段。本研究建立的方法不足之处在于，要求小麦背景中的黑麦片段必须含有高拷贝数的串联重复序列。

• 单位
  四川农业大学