红球菌g26中C17位脱氢酶的克隆表达及生物转化

作者：顾飞飞; 张诗雯; 田威^*

来源：沈阳药科大学学报, 2021, 38(02): 197-202.

DOI：10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2019.0665

• 红球菌属
• 生物转化
• 甾体化合物
• C17位还原

目的对红球菌g26中的短链脱氢酶基因进行克隆表达并考察其能否将甾体化合物雄甾-4-烯-3.17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD) C17位羰基还原为羟基。方法通过检索数据库获得红球菌g26中的两个短链脱氢酶基因,应用PCR、重组表达载体的构建等生物技术在大肠杆菌中进行外源表达,破碎细胞后应用SDS-PAGE对可溶性蛋白进行分析,筛选出合适的目的蛋白诱导条件,进而进行酶的体外转化反应,应用薄层色谱分析、高效液相分析和质谱法鉴定产物结构。结果与结论红球菌g26中的短链脱氢酶可以转化甾体化合物AD为睾丸酮(TS)。红球菌g26内的短链脱氢酶参与了甾体化合物C17位羰基到羟基的还原反应。

• 单位
  沈阳药科大学