咔唑类生物碱衍生物CZ-7促进少突胶质前体细胞分化的研究

作者：王莎莎; 张钊; 毕皓植; 楚世峰; 贺文彬; 臧应达; 张东明; 陈乃宏^*

来源：中药新药与临床药理, 2020, 31(07): 781-787.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2020.07.006

• 黄皮咔唑类生物碱衍生物CZ-7
• 少突胶质前体细胞
• 少突胶质细胞
• 分化
• 髓鞘再生
• 大鼠

目的研究黄皮茎枝提取物咔唑类生物碱衍生物CZ-7对少突胶质前体细胞(OPCs)分化的影响。方法通过体外分离培养新生SD大鼠少突胶质前体细胞,并对分离的少突胶质前体细胞进行纯化;纯化后加入不同浓度CZ-7(0.1、1、10μmol·L-1)进行干预。在光学显微镜下连续观察细胞形态变化;采用免疫荧光染色法鉴定细胞;CCK-8法检测CZ-7对少突胶质前体细胞细胞活力的影响;免疫荧光染色法检测CZ-7对少突胶质前体细胞分化成熟的影响;Western Blot法检测CZ-7对髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响;qPCR法检测CZ-7对髓鞘相关基因MBP、PLP1表达的影响。结果分离纯化后获得了纯度较高的少突胶质前体细胞,继续培养至第7天时可自然分化成熟为少突胶质细胞。与对照组比较,CZ-7(0.1、1、10μmol·L-1)不影响少突胶质前体细胞细胞活力(P> 0.05)。少突胶质前体细胞纯化后加入CZ-7共孵育48 h,与对照组比较,CZ-7不同浓度组的少突胶质前体细胞(NG2阳性表达细胞)数明显减少(P <0.01),成熟少突胶质细胞(CC-1阳性表达细胞)数明显增多(P <0.01),成熟少突胶质细胞占总少突胶质细胞的百分比也明显升高(P <0.01);MBP蛋白表达量明显上调(P <0.05,P <0.01);髓鞘相关基因MBP、PLP1 mRNA表达水平明显上调(P <0.05,P <0.01)。结论 CZ-7能够明显促进SD大鼠少突胶质前体细胞分化成熟,从而有利于髓鞘再生。

• 单位
  天然药物活性物质与功能国家重点实验室; 中国医学科学院药物研究所; 山西中医药大学