绿色荧光蛋白标记杀鲑气单胞菌的构建及其初步应用

作者：杜以帅; 张丽娜; 马晓娜; 肖鹏; 孙斌; 蔡碧莹; 王顺奎; 于凯松; 刘鹰

来源：海洋科学, 2016, 40(12): 30-35.

• 杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)
• 绿色荧光蛋白
• 电转化
• 大西洋鲑(Salmo salar)

杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)是引起疖疮病的典型致病细菌,几乎可以侵染所有的鲑科(Aeromonas)鱼类,为水产养殖业带来巨大的经济损失。本研究通过电击转化法将原核表达载体p GFPuv成功导入杀鲑气单胞菌C4菌株(AS-C4)中,获得了绿色荧光蛋白标记的杀鲑气单胞菌菌株AS-C4GFP。AS-C4GFP菌株在氨苄青霉素抗性平板上生长良好,并在紫外光下激发出较强的绿色荧光。通过荧光显微镜观察菌体和PCR检测gfp和杀鲑气单胞菌vap A基因,表明gfp基因已经成功导入AS-C4中。用AS-C4GFP人工感染大西洋鲑(Salmo salar),从死亡鱼的脾脏、肝脏、肾脏中均能分离出AS-C4GFP,AS-C4GFP在脾脏中最多。AS-C4GFP具有特异性和可视性,为研究杀鲑气单胞菌对大西洋鲑的侵染途径提供了一种良好的生物材料。

• 单位
  山东东方海洋科技股份有限公司; 青岛科技大学; 天津师范大学; 中国科学院海洋研究所