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摘要
为了研究异源无乳链球菌胞外产物灭活疫苗免疫罗非鱼后的免疫效果， 本研究采用10%甲醛溶液灭活法对无乳链球菌HN0901和GX1101制备了胞外产物灭活疫苗， 通过腹腔注射途径免疫健康奥尼罗非鱼（Oreochromis niloticus♀×O.aureus♂）， 在免疫后28 d攻毒同/异源无乳链球菌， 测定了免疫后和攻毒后罗非鱼的免疫应答反应和血清抗体效价， 并比较了罗非鱼在腹腔注射1×108 CFU/尾无乳链球菌后的相对免疫保护率和交叉免疫保护率。结果显示， 免疫鱼谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）在免疫后28 d显著高于对照组， 但在攻毒后显著低于对照组; 与对照鱼相比， 免疫鱼的超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）水平在免疫和攻毒后均有不同程度的提高， 丙二醛（MDA）显著降低（P<0.05）。实时定量PCR结果显示， 炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和TGF-β， 体液免疫相关基因HSP 70， MHC-Ⅱ和IgM在免疫和攻毒后也呈现显著升高趋势， 并显著高于对照组（P<0.05）。血清抗体效价于免疫后第28天达到1∶6400， 显著高于对照组（P<0.05）。攻毒实验结果显示免疫组在同源和异源无乳链球菌攻毒后相对免疫保护率在31.6%～47.4%不等。结果表明， 研制的灭活疫苗免疫罗非鱼后， 能够显著诱导罗非鱼体内的免疫应答， 产生中等疫苗效力， 对同/异源无乳链球菌都具有免疫保护能力。本研究结果为深入研究罗非鱼链球菌病的免疫预防技术和研制二价疫苗奠定了基础。
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单位浙江省淡水水产研究所; 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心; 南京农业大学
