摘要

目的通过对齐齐哈尔市第一医院碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌(CRE)耐药基因型的检测及耐药机制分析,为临床抗生素的合理应用和感染的防控提供科学依据。方法收集2018年5月—2020年1月齐齐哈尔市第一医院检验科住院患者的痰液、创口分泌物、肺泡灌洗液、尿液及血液等临床病房患者合格标本中分离到的肠杆菌科细菌,应用梅里埃Vitek2-compact全自动微生物细菌鉴定与药敏仪及K-B纸片扩散法鉴定和筛选CRE菌株;采用改良Hodge试验初步判断CRE菌株产碳青霉烯酶情况;应用聚合酶链式反应PCR法检测CRE菌株的耐药基因型以及膜孔蛋白相关基因型。结果 38株CRE中,26株肺炎克雷伯菌,9株大肠埃希菌及3株阴沟肠杆菌,标本主要来源于痰,主要分布于ICU、神经外科等科室。检测了CRE菌株对该院临床常用的19种抗生素的耐药性:头孢菌素类药物,除头孢吡肟耐药率89.5%、头孢他啶耐药率94.8%外,头孢唑啉、头孢呋辛及头孢曲松耐药率都为100%;β-内酰胺类抑制剂复合制剂类药物氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦及哌拉西林/他唑巴坦耐药率分别为100%、84.2%及81.6%;喹诺酮类药物环丙沙星及左氧氟沙星耐药率分别为94.7%及81.6%;碳青霉烯类药物厄他培南及亚胺培南耐药率分别为97.4%及84.2%;氨基糖苷类药物庆大霉素、妥布霉素及阿米卡星耐药率分别为60.5%、42.1%及26.3%;氨曲南耐药率为84.2%;复方新诺明耐药率为57.9%;未检出对替加环素耐药的菌株。改良Hodge试验阳性菌株都为产KPC型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌。PCR方法检测菌株耐药基因型:SHV有24株,CTX有23株,KPC有15株,NDM有5株,其中IMP、TEM、VIM、GES、OXA基因型未检出,检出膜孔蛋白OmpC有36株,膜孔蛋白OmpF、OmpK35、OmpK36均未检出,有15株菌株检测出两种或两种以上耐药基因型。结论该院CRE菌株主要为肺炎克雷伯菌,主要来源于临床患者痰液标本,CRE感染常发生于ICU、神经外科等患者基础疾病较多、抗生素应用以及机械通气较频繁的科室;CRE菌株对临床常用药物耐药情况严重,使CRE在治疗中面临用药选择的困难;改良Hodge试验可以用来初筛菌株是否产KPC型碳青霉烯酶;该院CRE菌株耐药机制以产碳青霉烯酶为主,其次为β-内酰胺酶和/或AmpC酶基因的表达同时合并膜孔蛋白的突变或缺失。