含V-Set免疫球蛋白域蛋白2对胰腺癌细胞恶性生物学行为影响及机制

作者：胥济川; 江建新^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(01).

• 胰腺癌
• 增殖
• 侵袭
• 迁移
• 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

目的探究含V-Set免疫球蛋白域蛋白2(VSIG2)对人胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及具体机制。方法质粒转染构建VSIG2敲低和过表达细胞系, 分为sh-VSIG2#1/sh-VSIG2#2组和oe-VSIG2组, 并分别以sh-NC和Vector组作为对照。蛋白质印迹法(Western blot)验证转染效率。细胞计数试剂盒(CCK-8)和平板克隆测定胰腺癌细胞增殖能力。Transwell和划痕实验检测侵袭及迁移能力。KEGG对VSIG2相关基因进行通路富集分析, Western blot检测通路关键指标的表达量。以VSIG2过表达细胞系进行功能回复, Western blot检测通路指标表达量变化。组间比较采用t检验和单因素方差分析。结果 CCK-8结果显示, sh-VSIG2#1比sh-VSIG2#2组72 h吸光度值低于sh-NC组(1.122±0.056比0.997±0.063比1.561±0.072, t=8.876、8.994, P<0.05);oe-VSIG2组72 h吸光度值高于Vector组(2.103±0.102比1.604±0.089, t=12.215, P<0.01)。平板克隆结果显示敲低组细胞集落数减少, 而过表达组细胞集落数增多。Transwell迁移实验结果显示, sh-VSIG2#1比sh-VSIG2#2组单位视野穿过细胞数少于sh-NC组[(103.9±19.3)个比(110.2±20.7)个比(202.6±18.6)个, t=6.236、6.331, P<0.01);oe-VSIG2组穿过细胞数多于Vector组[(397.3±10.6)个比(214.1±15.4)个, t=7.024, P<0.01]。而侵袭实验结果显示, sh-VSIG2#1/sh-VSIG2#2组单位视野穿过细胞数少于sh-NC组[(87.9±12.5)个比(90.6±8.6)个比(203.4±11.2)个, t=7.869, P<0.01];oe-VSIG2组穿过细胞数多于Vector组[(345.7±10.6)个比(210.4±9.4)个, t=6.004, P<0.05]。划痕实验显示敲低组细胞迁移能力减弱, 而过表达组迁移能力增强。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路参与VSIG2促癌过程。回复实验中加用雷帕霉素(Rapamycin, 50 nmol/L)可逆转胰腺癌恶性表型。过表达VSIG2后mTOR通路激活增加, 同时加用雷帕霉素(Rapamycin, 50 nmol/L)后mTOR通路被抑制。结论 VSIG2激活mTOR信号通路促进胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。

• 单位
  贵州医科大学