铜绿假单胞菌pvdQ基因在肠道上皮细胞Caco-2中的表达及其功能研究

作者：叶露; 李洪涛; 王丽丽; 邢铭友; 宋建新

来源：华中科技大学学报(医学版), 2010, 39(05): 649-652.

• pvdQ基因
• 3O-oxo-C12-HSL
• 密度感应系统
• Caco-2细胞

目的探讨铜绿假单胞菌pvdQ基因阻止密度感应系统自体诱导因子3O-oxo-C12-HSL干扰肠道上皮细胞Caco-2的作用。方法构建带有FLAG标签的pvdQ基因真核表达质粒pIRES2-EGFP-pvdQ并鉴定,将带有pvdQ基因的质粒转染入Caco-2细胞,并用Western blot法检测pvdQ基因在Caco-2细胞中的表达。3O-oxo-C12-HSL干扰转染前后的Caco-2细胞,利用质谱分析仪检测Caco-2细胞上清中3O-oxo-C12-HSL浓度变化。结果经酶切鉴定pvdQ基因真核表达载体构建成功,Western blot检测结果显示pvdQ基因能在人肠道上皮细胞Caco-2中表达。质谱分析结果显示,转染pvdQ基因后,Caco-2细胞上清中3O-oxo-C12-HSL浓度明显减少(P<0.05)。结论 pvdQ基因成功在人肠道上皮细胞Caco-2中表达,并降解细胞周围3O-oxo-C12-HSL分子,为进一步研究pvdQ基因对Caco-2细胞的保护作用奠定基础。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院