人巨细胞病毒UL123基因全长及其外显子4的克隆与表达

作者：文兰; 陈利玉; 邬**; 傅鹰; 罗罗; 敏华; 赵俊琴

来源：医学临床研究, 2006, (06): 817-820.

• 巨细胞病毒属/遗传学
• 基因表达
• 克隆
• 分子 cytomegalovirus/GE
• gene expression
• cloning
• molecular

【目的】克隆人巨细胞病毒(HCMV)UL123基因cDNA全长(ie1)及其外显子4(ie1-exon 4),构建原核表达重组质粒,诱导立即早期蛋白1(IE1)及其C-端86-491氨基酸(IE1-C86~491)表达,并鉴定表达产物。【方法】分别用RT-PCR和PCR法将ie1和ie1-exon 4从感染了HCMV的人胚肺成纤维细胞(HEL)中扩增出来,再分别克隆入原核表达载体pTWIN1上intein2的N端,转化大肠杆菌,经PCR、限制性酶切和测序鉴定阳性重组子,在低温和低IPTG浓度下诱导重组子表达可溶性重组融合蛋白rIE1/intein2和rIE1-C86~491/intein2,用...

• 单位
  中南大学湘雅医学院