黄精炮制前后多糖的相对分子质量分布和免疫活性比较

作者：万晓莹; 刘振丽; 宋志前; 宁张弛; 彭诗涛; 梁东蕊; 王淳^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2021, 27(15): 83-90.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20210446

• 酒制
• 黄精
• 多糖
• 相对分子质量
• 巨噬细胞
• 免疫功能
• 炎症反应

目的:研究黄精炮制前后多糖相对分子质量及其分布变化,以及其不同多糖级分对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能和炎症反应的影响。方法:采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定黄精多糖(SC)和酒黄精多糖(JC)相对分子质量及其分布情况,并通过透析法得到不同相对分子质量多糖级分,将上述多糖级分分别作用于正常和经脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞,采用细胞增殖与活性检测试剂盒-8(CCK-8)法选取最佳给药浓度,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β的浓度,格里斯(Griess)试剂法检测一氧化氮(NO)的浓度。结果:SC和JC按相对分子质量及其分布范围可分为4个部分,第Ⅰ部分(14 800～2 273 kDa),第Ⅱ部分(2 148～296 kDa),第Ⅲ部分(12～1 kDa),第Ⅳ部分(818～362 Da)。而黄精经酒制后,第Ⅰ部分和第Ⅲ部分的多糖级分发生了改变,因此,选择将SC和JC按重均相对分子质量(MW)>50 kDa和<50 kDa各分成2个部分。对于正常小鼠腹腔巨噬细胞,JC能显著促进细胞分泌TNF-α(P<0.01),但SC无明显作用;4个多糖级分SD(MW>50 kDa的SC级分),JD(MW>50 kDa的JC级分),SX(MW<50 kDa的SC级分),JX(MW<50 kDa的JC级分)均能显著促进细胞分泌TNF-α(P<0.01),但仅JX能明显促进细胞分泌NO(P<0.05);另外,JX组促进细胞分泌TNF-α作用显著强于JD组(P<0.01)。对于LPS诱导巨噬细胞模型,JC和SC均能显著抑制细胞分泌TNF-α和IL-1β(P<0.01),且JC作用更强;不同多糖级分间,JX抑制细胞分泌TNF-α和IL-1β的作用显著强于JD(P<0.01),SX抑制细胞分泌TNF-α作用显著强于SD(P<0.01)。结论:黄精酒制前后多糖相对分子质量及其分布发生了改变,JC和SC增强免疫调节作用主要是通过抑制炎症反应,MW<50 kDa级分是其主要有效部位,且黄精在酒制后其多糖成分抑制炎症反应的作用增强。

• 单位
  中国中医科学院中医基础理论研究所