摘要
目的 研究内皮素3(ET-3)对人恶性黑素瘤(MM)A375细胞核因子(NF)-κB/Bfl-1抗凋亡通路的调节.方法 用ET-3(100 nmol/L)刺激A375细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率.RT-PCR及Western印迹测定不同浓度ET-3(0、1、10、100 nmol/L)及其与内皮素受体B(ETRB)阻断剂BQ788联合干预A375细胞后,Bfl-1在mRNA和蛋白质水平的表达.Western印迹检测相同条件干预下磷酸化NF-κB(pNF-κB)的蛋白表达.结果 ET-3可以降低A375细胞的凋亡率(F=10.68,P<0.05).ET-3对A375细胞Bfl-1 mRNA和蛋白表达水平的影响呈浓度依赖性上调,BQ788明显阻断ET-3上调Bfl-1的效应(P<0.01).Western印迹检测结果显示,ET-3显著上调pNF-κB的表达(P<0.05),BQ788干预下其表达水平降低,接近对照组,ET-3(100 nmol/L)+BQ788组与100 nmol/L ET-3组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 ET-3/ETRB通过激活NF-κB/Bfl-1抗凋亡通路抑制A375细胞凋亡.
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单位华中科技大学同济医学院附属协和医院; 湖北省中山医院; 华中科技大学; 武汉市皮肤病防治研究所