载脂蛋白ApoE的原核表达以及与PrP蛋白间相互作用的初步研究

作者：高晨; 韩俊; 石琦; 陈岚; 万言珍; 高永军; 陈建明; 姜慧英; 周伟; 张宝云; 董小平

来源：病毒学报, 2005, (06): 443-447.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001582

• 载脂蛋白ApoE
• 抗体
• PrP蛋白
• 分子间相互作用 apolipoprotein E
• antibody
• PrP protein
• molecular interaction

利用RT-PCR方法从人源细胞系SH-SY5Y cDNA中扩增出载脂蛋白ApoE基因,并在pET32a载体中表达融合蛋白His-ApoE,以纯化的融合蛋白免疫实验用兔获得特异性抗体,利用ELISA及免疫共沉淀方法对ApoE及PrP之间的相互作用进行研究。结果表明,SDS-PAGE显示表达的His-ApoE蛋白的相对分子量约为54 000,所制备的抗血清ELISA效价可达到1∶406 900,并能够有效地识别重组及动物组织中的内源性ApoE蛋白。ELISA和免疫共沉淀实验均显示,原核表达的ApoE可与全长的PrP蛋白(PrP23-231)在体外发生相互作用,其作用位点可能位于PrP蛋白的N端。这...

• 单位
  中国协和医科大学; 医学分子生物学国家重点实验室; 基础医学院; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 西安交通大学