人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡对巨噬细胞极化的影响

作者：陈天琰; 张磊; 高建一; 余佳红; 唐彬; 胡嘉波^*

来源：江苏大学学报(医学版), 2020, 30(06): 515-525.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y200060

• 神经干细胞
• 微囊泡
• 炎症
• 巨噬细胞
• 极化

目的:探究人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡对巨噬细胞极化的影响。方法:Dil标记神经干细胞微囊泡,流式细胞仪和共聚焦显微镜观察THP-1巨噬细胞对微囊泡的内化;实时荧光定量PCR筛选微囊泡最适浓度;100 ng/m L脂多糖刺激THP-1细胞6 h后,微囊泡处理12 h,实时荧光定量PCR检测巨噬细胞炎性因子IL-1β,肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及IL-6的mRNA表达水平;微囊泡处理24 h,蛋白免疫印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)和精氨酸酶1 (Arginase-1,Arg-1)蛋白表达水平;流式细胞术检测THP-1巨噬细胞M1极化表面标志CD86表达。结果:THP-1巨噬细胞在12 h和24 h均能明显内化神经干细胞微囊泡; 0.12μg/m L微囊泡具有最适调控作用;与未处理细胞相比,脂多糖处理后明显增加THP-1细胞IL-1β,TNF-α,IL-6等mRNA和i NOS蛋白,Arg-1蛋白表达差异无统计学意义(P <0.05);经神经干细胞微囊泡处理后THP-1细胞IL-1β,TNF-α,IL-6等mRNA和i NOS蛋白表达明显降低(P <0.05);与未处理细胞相比,脂多糖和微囊泡处理后THP-1巨噬细胞CD86表达差异无统计学意义。结论:人胚胎干细胞源神经干细胞微囊泡能够减少THP-1细胞炎性细胞因子和i NOS表达,抑制巨噬细胞M1极化。

• 单位
  江苏大学