伪狂犬病病毒对小鼠脾脏细胞焦亡相关因子表达的影响

作者：孙伟; 刘杉杉^*; 高俊波; 李华磊

来源：黑龙江畜牧兽医, 2022, (13): 89-134.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.09.0182

• 伪狂犬病病毒
• 小鼠
• 脾脏
• 细胞焦亡
• 炎性反应

为了研究感染猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)对小鼠脾脏细胞焦亡相关因子的影响，试验将40只Balb/c小鼠随机分为对照组和试验组(包括48小时组、72小时组、96小时组),试验组小鼠皮下接种1×103 TCID50/100μL PRV 200μL,对照组小鼠注射等量生理盐水。采集小鼠脾脏，采用酶联免疫吸附试验检测脾脏组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18 (interleukin-18,IL-18)水平；分别采用实时荧光定量PCR和Western-blot方法，检测细胞焦亡相关因子核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、Gasdermins家族蛋白D(GSDMD)、IL-1β和IL-18基因和蛋白表达水平；采用免疫组织化学方法检测脾脏组织中Caspase-1和IL-β蛋白表达量。结果表明：与对照组相比，48,72,96小时组脾脏组织中IL-1β极显著升高(P<0.01);48小时组IL-18显著升高(P<0.05),72,96小时组极显著升高(P<0.01)。感染PRV后48小时组NLRP3基因相对表达量极显著升高(P<0.01),72,96小时组显著升高(P<0.05);48,72小时组Caspase-1基因相对表达量显著升高(P<0.05),96小时组极显著升高(P<0.01);96小时组GSDMD基因相对表达量极显著升高(P<0.01);72,96小时组IL-1β基因相对表达量极显著升高(P<0.01);48,72小时组IL-18基因相对表达量显著升高(P<0.05),96小时组极显著升高(P<0.01)。与对照组比较，48,72,96小时组小鼠脾脏细胞中NLRP3、Caspase-1和IL-18蛋白相对表达量均呈现上升趋势，而IL-1β蛋白在72,96小时，GSDMD蛋白在96小时时呈现明显上升趋势。免疫组织化学法进一步证实，Caspase-1和IL-β蛋白在小鼠脾脏中呈上调表达。说明PRV感染小鼠后，可通过上调表达细胞焦亡相关因子促进炎性反应的发生。

• 单位
  铜仁职业技术学院