摘要

目的:利用自蒸发与冷冻干燥相结合技术,构建壳聚糖-藻酸钙-锂皂石纳米片止血复合膜(止血复合膜),体外检测促凝血效果及细胞毒性,体内验证止血效果与黏膜黏附效果,探讨其作为新型口腔止血膜的可行性。方法:分层构建双层结构止血复合膜,利用自蒸发法制备下层壳聚糖部分,结合冷冻干燥技术制备上层藻酸钙-锂皂石纳米片海绵部分。采用扫描电镜与透射电镜观察复合膜的微观结构,X射线衍射分析其成分。使用凝血板法分析止血复合膜组、医用纱布组、海壳生R复合膜组以及空白对照组的体外凝血时间。培养NIH/3T3细胞,与止血复合膜浸提液(实验组)、壳聚糖-藻酸钙浸提液(阴性对照组)及细胞培养基(空白对照组)共培养24、48 h,以CCK-8法检测细胞增殖情况。构建比格犬口腔颊黏膜创面与下颌前磨牙拔牙创模型,体内验证凝血复合膜的止血性能及口腔黏膜黏附效果。采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:止血复合膜呈双层结构,上层为包含锂皂石纳米片的海绵样结构,下层为均质壳聚糖膜,X射线衍射分析证实锂皂石纳米片的存在。体外凝血实验中,止血复合膜组的体外凝血时间显著低于医用纱布组、海壳生组R及空白对照组(P<0.001)。CCK-8检测显示,实验组、阴性对照组及空白对照组之间的细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05)。动物实验证实,止血复合膜具有良好的黏膜黏附性及止血效果。结论:制备的止血复合膜具有较好的止血作用,无明显细胞毒性,具有作为口腔止血膜的潜能。

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