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摘要
利用单因素试验探索了热激处理、预萌发时间、供体宿主菌的类型、供受比及MgCl2浓度对链霉菌SH121接合转移效率的影响,结果显示:在50℃热激10min,37℃预萌发1h,以大肠杆菌DCDA/pUZ8002为供体宿主菌,在供受比为100∶1时,使用添加40mmol/L MgCl2的培养基M-ISP4,接合转移效率最高可达到每受体1.03×10-3个接合子。利用建立好的接合转移方法,将整合型质粒pSET152和基因敲除质粒pYZ09成功地导入链霉菌SH121,证实该方法可用于后期链霉菌SH121活性天然产物的挖掘及其相关生物合成基因簇的研究工作。
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单位华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室
