ATF4在顺铂致肝癌细胞HepG2凋亡中的作用

作者：王旭东; 黄治勇; 石训仁; 华先良

来源：广东医学, 2017, 38(09): 1322-1325.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.2017.09.004

• 肝肿瘤
• ATF4
• 顺铂
• 凋亡
• 内质网应激反应

目的探讨ATF4在顺铂诱导的肝癌细胞HepG2凋亡中的变化,并对其作用进行初步研究。方法人肝癌细胞Hep G2经不同浓度顺铂处理24和48 h后,MTS法检测细胞活力;Western blot检测内质网应激反应及凋亡相关蛋白(Bip、ATF4、PARP、activated-Caspase3、CHOP)表达的变化;使用siRNA干扰技术沉默ATF4的表达,并观察沉默ATF4蛋白表达后,肝癌细胞对顺铂敏感性的变化;利用Annexin V-FITC和PI双标法,在倒置荧光显微镜中检测细胞凋亡情况。平板克隆形成实验用于判断单个细胞克隆生长速度。结果与溶剂对照组相比,顺铂明显抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡;时间和浓度依赖性地引起内质网应激反应相关蛋白CHOP、ATF4表达水平上调,但不影响Bip的蛋白表达;同时导致activated-Caspase3的活化,引起PARP蛋白的切割。使用siRNA沉默ATF4的蛋白表达后,能部分逆转顺铂引起的细胞凋亡以及克隆形成抑制。结论顺铂可以通过上调ATF4的表达,触发内质网反应,从而诱导肝癌细胞凋亡。

• 单位
  黄石市中心医院; 湖北理工学院