摘要
目的探讨过表达B和T淋巴细胞衰减子(BTLA)的树突状细胞(DC)对C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)免疫反应的调节作用。方法构建携带目的基因BTLA的重组慢病毒载体,以感染复数15转染原代分离培养的C57BL/6小鼠骨髓源性的DC从而在DC上过表达BTLA。构建C57BL/6小鼠EAE模型,发病高峰时分离脾细胞并从中磁珠分选出CD4~+T淋巴细胞并与过表达BTLA的DC共培养,以ELISA法检测共培养体系中辅助性T淋巴细胞Th1类细胞因子干扰素-γ和Th2类细胞因子IL-10的含量。结果成功构建携带BTLA基因的重组慢病毒LPP-Mm26645-Lv203-400,以感染复数15转染培养5 d后的DC,96 h后DC上有BTLA过表达。采用MOG35-55多肽免疫C57BL/6小鼠后,21~24 d出现发病高峰,分选出的CD4~+T淋巴细胞与过表达BTLA的DC共培养72 h,ELISA法检测共培养体系中干扰素-γ分泌明显减少,IL-10分泌明显增多(P均<0.05)。结论过表达BTLA可以增强DC的耐受性,通过逆转Th1/Th2失衡,对EAE产生特异性抗原免疫耐受,负性调节EAE的免疫反应。
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单位神经内科; 中山大学附属第三医院