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摘要
海胆酮是一种酮式类胡萝卜素，主要从海胆及藻类等海洋生物中提取。本文采用Ellman法研究海胆酮对乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase， AChE）的抑制作用，应用酶动力学，荧光光谱，圆二色光谱和分子对接技术研究海胆酮对AChE的抑制机理，并用淀粉样β蛋白片段25-35(Amyloid beta-peptide 25-35， Aβ25-35)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12）建立阿尔兹海默症（Alzheimer’s disease，AD）模型，研究海胆酮对AD细胞模型氧化应激损伤的作用。结果表明，海胆酮有很强的抑制AChE活性，其IC50值为（16.29 ± 0.97）μg/mL，抑制常数Ki为3.82 μg/mL，表现为竞争性抑制；海胆酮可诱导AChE二级结构改变，更容易与AChE活性中心氨基酸Ser200、His440、Trp84和Tyr121结合，阻碍底物碘代硫代乙酰胆碱（Acetylthiocholine iodide， ATCI）与酶结合，从而引起酶活性降低。海胆酮能有效的抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞中AChE的活性，降低丙二醛（MDA）含量，增加超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力，减轻Aβ25-35诱导的PC12细胞氧化应激损伤。本研究基于乙酰胆碱酯酶和氧化应激阐明了海胆酮对AD的潜在作用机制，为海胆酮在功能食品、生物医药等领域的应用提供了数据支持和理论根据。
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单位食品与生物工程学院; 集美大学
