摘要

咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶是植物中参与木脂素前体松柏醇生物合成的关键酶,为了研究菘蓝中CCoAOMT的表达特征,采用c DNA末端快速扩增(RACE)、PCR克隆IiCCoAOMT的全长cDNA及其基因组DNA序列;通过RT-qPCR检测比较IiCCoAOMT在四倍体菘蓝和二倍体菘蓝各器官中的表达以及不同胁迫刺激下的表达情况。IiCCoAOMT的c DNA序列全长1 098 bp (GenBank登录号:DQ115904),含774 bp的开放阅读框(ORF),编码257个氨基酸残基,对应的DNA序列含有5个外显子和4个内含子。多重序列比对结果显示Ii CCoAOMT与拟南芥At CCoAOMT同源性最高,且含有植物氧甲基转移酶-I的三个特征元件:motif A、motif B、motif C。在两种倍性菘蓝的根和叶中,四倍体表达量高于二倍体,而在两种倍性菘蓝的茎中表达量接近相同。冷处理(4℃)、盐处理(NaCl)、茉莉酸甲脂(MeJA)、赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)和水杨酸(SA)均能诱导IiCCoAOMT表达水平的上调。首次从菘蓝中克隆得到IiCCoAOMT并进行了表达特征研究,为进一步阐明菘蓝多倍性优势的分子机制提供理论基础,也为通过基因工程技术提高菘蓝中活性木脂素的含量提供了条件。