非洲猪瘟病毒p30蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

作者：黄剑; 徐晶晶; 程雪飞; 李国新; 高飞; 童光志^*

来源：中国动物传染病学报, 2020, 28(05): 37-41.

• 非洲猪瘟病毒
• p30基因
• 原核表达
• 多克隆抗体

本研究利用PCR方法扩增非洲猪瘟病毒(ASFV)SY18株的结构蛋白CP204L基因,并将其克隆至原核表达载体pCold I,构建重组表达质粒pCold I-p30,并将其转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE显示,p30蛋白在大肠杆菌大量表达。获得的p30经纯化免疫小鼠,4次免疫后,采取其血清经过间接免疫荧光和Western blot检测结果表明,获得的多克隆抗体具有明显的特异性。该研究获得的针对p30的多克隆抗体为ASFV早期诊断试及p30蛋白结构功能研究奠定了基础。

• 单位
  动物科学学院; 福建农林大学; 中国农业科学院上海兽医研究所