大鼠骨髓间充质干细胞诱导血管内皮细胞的实验研究

作者：李新喜; 吾甫尔·依马尔; 王护国

来源：新疆医科大学学报, 2017, 40(07): 928-933.

• 骨髓间充质干细胞
• VEGF诱导
• bFGF诱导
• 内皮细胞

目的探讨诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向血管内皮细胞(VEC)分化的方法和VEC的生物学特性。方法采用贴壁筛选法收集SD大鼠股骨及胫骨骨髓细胞中的BMSCs,孵育至第三代细胞汇合90%后分为2组:实验组在含10%胎牛血清(FBS)的M199培养液中添加诱导剂血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF);对照组加入含10%FBS的M199培养液,继续培养、孵育。观察2组细胞生长形态特征,应用CCK8试剂盒检测细胞增殖,绘制细胞生长曲线。采用流式细胞仪检测2组细胞表面特异性标记物CD29、CD44、CD90、CD31、CD34和血管性假血友病因子(vWF),免疫组织荧光法检测2组vWF。结果 P3代细胞表达CD29、CD44、CD90的阳性率分别为74.8%、84.4%、95.5%,提示在P3代时已可以得到相对较纯的MSCs。实验组细胞表面特异性标记物CD31、CD34、vWF分别为0.1%、0.4%、6.8%,对照组细胞表面特异性标记物CD31、CD34、vWF分别为3.3%、0.1%、5.5%。实验组免疫荧光染色vWF阴性。结论在无菌环境下SD大鼠全骨髓细胞通过换液、传代培养得到相对较纯的P3代细胞,方法简单易行,但大鼠BMSCs添加VEGF和bFGF诱导后未能分化为VEC。

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院