基于颜色判定的环介导恒温扩增技术快速检测铜绿假单胞菌的研究

作者：王欢; 黄庆; 史大川; 揣征然; 府伟灵

来源：第三军医大学学报, 2012, (22): 2264-2268.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2012.22.001

• 铜绿假单胞菌
• 环介导恒温扩增
• OprL基因
• 快速检验 loop-mediated isothermal amplification
• Pseudomonas aeruginosa
• OprL gene
• rapid detection

目的建立了一种基于颜色判定的,能够快速准确地检测铜绿假单胞菌的LAMP方法。方法针对铜绿假单胞菌OprL基因设计3对LAMP引物,通过引物特异性识别OprL的8个独立区域来快速检测铜绿假单胞菌。如果在反应前添加荧光染料羟基萘酚蓝(HNB)或钙黄绿素(Calcein),其结果可以通过肉眼观察反应前后颜色变化来判定并经琼脂糖凝胶电泳验证。对该技术进行特异性、灵敏度分析,利用LAMP和PCR同时检测临床标本。结果设计出针对铜绿假单胞菌OprL基因的恒温扩增检测方法。本恒温扩增检测法只扩增铜绿假单胞菌DNA,对其他菌不扩增,显示出良好的特异性。其最低检测限为17.414 pg/μl,PCR方法最低检出...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学