西黄丸抑制卵巢癌细胞线粒体能量代谢的效应及机制

作者：颜显欣; 洪守亿; 马瑞瑞; 王艳秋; 布筠艺; 马民

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-9.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230829

• 西黄丸
• ARHI
• 卵巢癌
• 线粒体
• 能量代谢

目的：研究西黄丸浸提液对卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体能量代谢的影响，并探讨其作用机制。方法：体外培养卵巢癌SKOV3和HEY细胞，分别加入不同浓度(0、5、10、15、20 g·L-1)西黄丸浸提液干预SKOV3和HEY细胞，采用噻唑蓝(MTT)法检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞存活率的影响；用试剂盒检测SKOV3和HEY细胞三磷酸腺苷(ATP)浓度；流式细胞术检测SKOV3和HEY细胞活性氧(ROS)含量；用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测西黄丸浸提液对SKOV3和HEY细胞线粒体相关蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α)、线粒体转录因子A(TFAM)、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)及印迹抑癌基因Ras同源家族Ⅰ(ARHI)的表达；Mito-Tracker Green染色观察SKOV3和HEY细胞线粒体形态学变化。结果：与空白组比较，不同浓度西黄丸浸提液给药24，48h能明显抑制卵巢癌SKOV3和HEY细胞存活率( P＜0.05，P＜0.01)，呈浓度依赖关系。与空白组比较，西黄丸浸提液10、15和20 g·L-1组的ATP水平显著降低 ( P＜0.05，P＜0.01)；与西黄丸浸提液10 g·L-1和15 g·L-1组比较，西黄丸20 g·L-1组ATP浓度显著降低(P＜0.05)。与空白组比较，西黄丸浸提液10、15、20 g·L-1组SKOV3和HEY细胞内ROS含量显著增加( P＜0.05，P＜0.01)，且呈浓度依赖性；与西黄丸浸提液10 g·L-1组比较，西黄丸浸提液20 g·L-1组ROS含量显著增加(P＜0.05)。与空白组比较，不同浓度的西黄丸浸提液(10 、15、20 g·L-1)组SKOV3和HEY细胞的ARHI蛋白表达水平显著升高(P＜0.01)，且随着西黄丸浸提液浓度升高，ARHI蛋白表达逐渐升高；与西黄丸10 g·L-1和15 g·L-1组比较，西黄丸20 g·L-1组ARHI蛋白表达水平显著升高(P＜0.05)；与空白组比较，不同浓度西黄丸浸提液(10、15、20 g·L-1)组SKOV3和HEY细胞的PCG1ɑ、TFAM、TOMM20蛋白表达水平明显降低(P＜0.05，P＜0.01)，且呈浓度依赖性；与西黄丸浸提液10 g·L-1和15 g·L-1组比较，西黄丸浸提液20 g·L-1组HEY细胞TFAM、TOMM20蛋白表达水平显著降低(P＜0.05)。与空白组比较，西黄丸浸提液20 g·L-1组SKOV3和HEY细胞Mito-Tracker 荧光强度显著降低(P＜0.05)。结论：西黄丸能破坏卵巢癌SKOV3和HEY细胞线粒体功能并降低细胞能量代谢，从而抑制SKOV3和HEY细胞增殖，其机制可能是通过上调ARHI，抑制PCG1ɑ/TFAM信号轴实现的。

• 单位
  暨南大学