大鼠HSG基因重组腺病毒载体的构建及鉴定

作者：郭晖; 王占伟; 郝文炯; 赵巍; 沈冰

来源：宁夏医科大学学报, 2013, (06): 679-682+729.

DOI：10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2013.06.037

• 增殖抑制基因
• 腺病毒
• 恶性胶质瘤 hyperplasia suppressor gene
• adenovirus
• spongiocytoma

目的构建大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,rHSG)的腺病毒载体,观察其在转染大鼠C6胶质瘤细胞后的表达。方法由前期构建的pGM-T-rHSG质粒中酶切rHSG基因片段,亚克隆入pShut-tle-CMV-EGFP重组穿梭载体中,而后与腺病毒骨架质粒pAdxsi酶切连接,经过抗性筛选及酶切鉴定得到阳性的pAdxsi-GFP-rHSG重组质粒;pAdxsi-GFP-rHSG质粒经PacI线性化后转染293细胞,包装重组腺病毒,进行PCR鉴定和PCR产物测序鉴定,Western-blot法检测C6胶质瘤细胞转染rHSG后的表达效果。结果酶切鉴定证实r...

• 单位
  宁夏医科大学总医院; 延安大学附属医院; 郑州市第七人民医院; 宁夏医科大学