猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的表达和重组蛋白的纯化及免疫学活性分析

作者：张永富; 韩春华; 林健; 刘月焕; 韦海涛; 祝俊杰; 赵景义; 李栋梁; 马国文; 布日额; 李明刚; 张婷; 刘永宏; 马明; 张秋雨

来源：安徽农业科学, 2009, (10): 4439-4442+4445.

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• ORF7基因
• 表达
• 纯化
• 免疫学活性 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus
• ORF7 gene
• Expression
• Purification
• Immun ological activity

[目的]在基因工程菌中实现猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因的高效表达,对表达的重组蛋白进行纯化,并探讨其免疫学活性及应用价值。[方法]将已构建好的重组表达载体pET-ORF7转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG在最适条件下诱导表达,其表达产物用SDS-PAGE和Western Blot进行检测。应用Ni-NTAHis.Bind Resin层析柱在变性条件下纯化表达产物,通过梯度透析进行复性。采用Western Blot及间接ELISA法检测复性后重组蛋白的免疫学活性。[结果]重组质粒pET-ORF7在大肠杆菌中以融合形式成功表达,融合表达产物主要以包涵体形式存在。SDS-...

• 单位
  内蒙古民族大学; 北京市畜牧兽医总站; 中国农业大学; 内蒙古农业大学; 北京市农林科学院